以2019-nCoV新型冠状病毒的高度特异性序列为靶区域，设计特异性引物和荧光探针，通过多重荧光PCR扩增，实现对2019-nCoV新型冠状病毒RNA的检测。这种方法也是目前新冠病毒检测试剂盒中最常用的检测方法。灵敏度及特异性都很高，检测时间在2h左右。同时，这种方法对样本采集以及检测实验室规范要求很高。若样本采集不到位，标本所带病毒量较少；实验操作失误，造成病毒RNA降解，易造成检测出现“假阴性”。为解决此问题，可在试剂盒中加入内源性内参的引物探针，用内源性内参的结果来质控标本采集提取及实验操作流程是否无误。

以2019-nCoV新型冠状病毒的高度特异性序列为靶区域，设计特异性逆转录引物及扩增引物，进行普通PCR扩增，PCR产物采用Sanger测序仪的片段分析功能进行检测，根据在目标片段长度位置是否出现检测峰为依据进行结果判断。此方法可根据不同待检病毒靶标设计不同目标长度的产物，进行多靶标检测，进而区分患者感染的是哪种冠状病毒，做到冠状病毒的分型检测。

高通量测序技术通过对待测目标的文库构建，测序，序列拼接比对获得待测目标基因组序列的全貌。对在此次武汉疫情爆发初期，通过构建宏基因组文库进行NGS测序鉴定出新型冠状病毒，并成功绘制出其全基因组序列信息。迅速判断出此次爆发的冠状病毒为一种新的冠状病毒，与SARS病毒序列高度相似。正是有了新冠病毒全基因组信息，才能使国内科学家及诊断企业研发荧光定量试剂盒用于新冠病毒的检测。目前，到了疫情攻坚战的此刻，新冠病毒溯源、流行、变异规律、变异监测、分子流行病学、人类感染的发病机理等尚待进一步明确。

这时，NGS技术在解析病毒变异情况和追踪病毒起源及演化方面，扮演着不可替代的核心作用。

此次2019-nCoV病毒为RNA病毒，在传播过程存在发生变异的可能性，并在一定程度上将影响RT-PCR的敏感性，采用高通量测序方法则可解决这一问题，并监测到可能的病毒变异。部分病毒含量较低的样本，在低于RT-PCR最低检出限时，采用高通量测序方法则可以提高阳性检出率，避免漏检和错检；对于疑似感染、多重感染或继发感染病原，采用高通量测序方法则可进行并发检测，提供更多可能感染的病原信息。

总之，从测定未知病原，到鉴定已知序列，再到阳性样本的结果确认以及可能存在的序列变异动态监控，都可以采用NGS方法有效应对。但NGS方法对实验室及实验人员操作要求是这几个检测方法中最高的。

抗体是机体感染病毒后，体液免疫应答的产物。通常，免疫球蛋白M(IgM)抗体在感染早期出现,免疫球蛋白G(IgG)抗体在感染中晚期出现。通过血清学检测，利用抗原抗体的特异性结合原理，配合标记物显色筛查，实现对人体血清、血浆或全血中新型冠状病毒IgM/IgG抗体的体外定性检测。

简言之，检测特异抗体也可以明确患者是否“近期或既往感染过新型冠状病毒”，有助于核酸检测阴性但临床上疑似患者的确诊。其主要优点在于现场即时诊断，不要任何检测设备，具备快速、便捷、高效检测的特点，可用于社区基层医院甚至家庭的早期初步筛查。

另一方面，核酸检测多采用上呼吸道样本（咽拭子为主），采集过程对于医护人员暴露风险极大，而抗体检测是通过血液样本检测，感染风险降低。但抗体检测容易受到血液标本中的一些干扰物质（如非特异IgM、类风湿因子、溶血所致的高浓度度血红蛋白等）的存在而出现“假阳性”结果，所以抗体检测必须采用IgM 和IgG同时检测且通常需多次动态检测来确认。

因此，特异抗体检测阳性不能像病毒核酸检测阳性一样作为病毒感染的“金标准”。